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薄層色譜TLC基本原理與技術發展狀況的分析

更新時間:2014-08-05      點擊次數:2011


     薄層色譜TLC基本原理

  薄層色譜TLC是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在移動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。

  薄層層析可根據作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。

  吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面,吸附就是其中一個相的物質或溶解于其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上,都可能發生吸附現象。

  物質分子之所以能在固體表面停留,這是因為固體表面的分子(離子或原子)和固體內部分子所受的吸引力不相等。在固體內部,分子之間相互作用的力是對稱的,其力場互相抵消。而處于固體表面的分子所受的力是不對稱的,向內的一面受到固體內部分子的作用力大,而表面層所受的作用力小,因而氣體或溶質分子在運動中遇到固體表面時受到這種剩余力的影響,就會被吸引而停留下來。吸附過程是可逆的,被吸附物在一定條件下可以解吸出來。在單位時間內被吸附于吸附劑的某一表面積上的分子和同一單位時間內離開此表面的分子之間可以建立動態平衡,稱為吸附平衡。吸附層析過程就是不斷地產生平衡與不平衡、吸附與解吸的動態平衡過程。

  例如用硅膠和氧化鋁作支持劑,其主要原理是吸附力與分配系數的不同,使混合物得以分離。當溶劑沿著吸附劑移動時,帶著樣品中的各組分一起移動,同時發生連續吸附與解吸作用以及反復分配作用。由于各組分在溶劑中的溶解度不同,以及吸附劑對它們的吸附能力的差異,zui終將混合物分離成一系列斑點。如作為標準的化合物在層析薄板上一起展開,則可以根據這些已知化合物的Rf值(后面介紹Rf值)對各斑點的組分進行鑒定,同時也可以進一步采用某些方法加以定量。


  薄層色譜TLC技術發展狀況

  薄層色譜TLC是20世紀50年代提出的一項平面色譜技術,它是一項快速、簡便、價廉的定性分析方法。和柱色譜一樣,顆粒的化學性質和尺寸(以及層厚度)會影響分離速度和可能的分離性質。樣品加在薄層板的一端,將該端浸漬在溶劑(展開劑)中進行分離。一旦分離過程接近完成(展開劑前沿接近薄層板另一端)時,薄層板就會被干燥并且可以用各種不同的方法從薄層板上得到定性和定量測量信息。這些方法包括密度法、熒光法甚至質譜法。

  薄層色譜TLC的三大工業應用領域為臨床、制藥以及食品檢測。臨床測試中TLCzui典型的應用是檢測濫用藥物。在制藥領域,TLC廣泛用于生產制備和質量保證(QA)。物質是否存在可以被定量確定,而定量檢測可以確定一個藥品樣本的純度。在食品工業領域,TLC被用于許多不同的應用,從脂質分離到食品染料分析。

  盡管TLC可以是*自動化的,但通常是手動操作的。因此,配件市場和耗材主導了市場,占據了近四分之三的*。TLC面臨HPLC巨大的競爭,尤其是在制藥工業面臨快速色譜(flash)的挑戰。

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