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液相色譜柱常見(jiàn)問(wèn)題解決方案

更新時(shí)間:2016-04-22      點(diǎn)擊次數(shù):1979
 1.     柱壓高 

壓力單位換算:1bar=0.987大氣壓=14.503psi=0.1MPa=1.0197kg/cm2

(1)新柱(未進(jìn)過(guò)樣品或只進(jìn)過(guò)柱效測(cè)試標(biāo)樣)壓力高:

以原廠報(bào)告上*一樣的條件下測(cè)試比較,若壓力在報(bào)告壓力值上下浮動(dòng)200-300psi以?xún)?nèi),可視為正常范圍;若高于出廠報(bào)告壓力值1倍或以上,有以下原因引起:

1. ~99.9%原因:系統(tǒng)壓力高,包括保護(hù)柱,泵,管路和接頭等引起。

   解決  方案:從系統(tǒng)上拿掉柱子,逐步檢查具體哪個(gè)部件引起的;或者換不同的儀器平衡柱子,比較壓力值,排除柱子本身的問(wèn)題。注意:必須是平衡柱子達(dá)足夠時(shí)間后的穩(wěn)定壓力值。如果您仍然不放心,可先寄回在我們公司實(shí)驗(yàn)室測(cè)試。

2. ~0.1%原因:柱子本身壓力高,寄回供應(yīng)方測(cè)試,如若核實(shí),可提供相關(guān)更換等處理。

   (2)使用一段時(shí)間后的舊柱壓力升高:

HPLC系統(tǒng)原因仍然存在,排除系統(tǒng)原因后,幾乎100%的原因是由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中雜質(zhì)在柱中的累積。

解決方案:盡量完善操作條件,做完樣品后要及時(shí)沖洗干凈,如緩沖鹽的流動(dòng)相一定要用高比例的水溶液(如90%)沖洗*后再用有機(jī)相保存。

2.     柱效低

(1)      新柱(未進(jìn)過(guò)樣品或只進(jìn)過(guò)柱效測(cè)試標(biāo)樣)柱效低:

以原廠報(bào)告的條件下測(cè)試同樣的標(biāo)樣,Supelco,Kromasil以及Agilent等柱子以甲苯作為比較,CNW柱子以萘作為比較,Waters柱子以苊作為比較,根據(jù)儀器不同,如果250*4.6mm,5um柱效在2000左右的差異可以認(rèn)為是符合出廠要求的;如果您的儀器測(cè)試結(jié)果相差太大,有以下原因:

1.~99.9%原因:系統(tǒng)問(wèn)題,包括接了保護(hù)柱,平衡時(shí)間不夠等引起。

解決   方案:取下保護(hù)柱(測(cè)試柱效時(shí)不能加保護(hù)柱),增加平衡時(shí)間,對(duì)于新柱,50mm長(zhǎng)的柱子平衡時(shí)間在30min以上,150mm的柱子在45min以上,250mm長(zhǎng)的柱子在75min以上。如果您不放心,可先寄回在我們公司實(shí)驗(yàn)室測(cè)試。

2. ~0.1%原因:柱子本身柱效低,寄回公司檢測(cè),如果核實(shí),可提供相關(guān)更換處理,

(2)使用一段時(shí)間后的舊柱柱效降低:

排除系統(tǒng)原因,基本是測(cè)試的條件和樣品導(dǎo)致,如測(cè)試條件的pH值在柱子耐受pH值范圍以外,導(dǎo)致柱子內(nèi)填料的溶解或鍵和相流失,此外,樣品前處理不好也會(huì)使柱子很快損壞。

3.     峰前延、拖尾等峰形不好

(1)柱效測(cè)試標(biāo)樣峰形差:基本原因都是平衡時(shí)間不夠引起,建議您平衡時(shí)間需達(dá)到*部分我們推薦的時(shí)間。此外,還有系統(tǒng)原因,可建議您換一臺(tái)再測(cè)試或寄回測(cè)試。

(2)樣品峰形差:如果柱效測(cè)試峰形很好,但是測(cè)試樣品峰形差,排除平衡時(shí)間等問(wèn)題后,基本是由于樣品性質(zhì)所引起,如一些堿性樣品會(huì)有拖尾現(xiàn)象,但是降低流動(dòng)相pH值會(huì)有改善。

4.     壽命短

根據(jù)不同系列的柱子或不同的測(cè)試條件,壽命長(zhǎng)短各有不同。建議您選擇性能穩(wěn)定、質(zhì)量有保證的品牌。

 

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